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c18色譜柱利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性（疏水性）的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。在硅膠基質的反相填料中，以鍵合有C18、C8、C2的球形多孔填料為常見，用途廣。通過鍵合CN鍵，改變反相介質極性，就變成了正相色譜。c18色譜柱固定相穩定，應用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解；當PH值大于7時硅膠易溶解；經常...
反相c18色譜柱是一種常見的色譜柱，用于化學分析和制藥領域中的分離和純化。與其他色譜柱不同，反相色譜柱采用的是非極性的固定相，例如碳鏈或芳香族化合物。這種非極性固定相可以與非極性或極性化合物發生相互作用，從而實現分離和純化。反相c18色譜柱的分離原理基于極性差異。在反相色譜柱中，樣品分子在流動相中逐漸進入固定相中，其中非極性的樣品分子會與固定相發生相互作用，停留時間較長；而極性的樣品分子則會較快地通過固定相，停留時間較短。通過調整流動相的成分和溫度，可以進一步實現對樣品分子的...
大賽璐手性柱是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化流動相和...
GL色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發所需的時間，并且使方法更具穩定性。柱越長，總柱效越高（n值越大），柱越長，分析時間也越長。GL色譜柱的柱效率與柱半徑平方成反比，內徑越小柱效越高，但內徑越大，柱容量也增加，允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時，則因柱內每塊理論板內不能建立平衡，將會導致色譜蜂畸變，柱分辨率降低，重現性不好。因此對于復雜樣品需要準確分離，要使用小內徑柱子。分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱；對于高pH值或者堿性化合物需要...
反相c18色譜柱是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。使用前，須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗，作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈舒展，使色譜柱的性能達到狀態。具體操作是，將配制好65%的乙腈/水沖洗后，把色譜柱進口端連接在色譜儀上，出口端放空（不可連上檢測器，以免污染了檢測器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干，過20分鐘后再接上檢測器，以1...
c18色譜柱鍵合到硅膠上的烷烴是18個碳，填充的是C18。適合分析弱極性物質里極性更弱的物質。分子量較小的物質，經常用C18來進行分析和分離。C18柱的填料對色譜柱的影響，碳含量即填料中的含碳量。傳統的測量技術是將填料加熱到碳氫鍵斷裂，然后通過測定損失的重量或形成的二氧化碳來計算碳含量。可以通過增加碳鍵的長度或增加鍵合密度來增加碳含量。碳含量增加，柱子的保留值增加。鍵合相的色譜行為與鍵合密度有關，也與硅膠的密度及填料的表面積有關，填料的密度越高，填柱所需的硅膠量越多，柱子的含...
異構體分析參照液相色譜法測定。參與構造交互項的各組成部分對被解釋變量的影響依賴于交互項中其他部分的取值。蛋白類藥物具有的翻譯后修飾，如糖基化、N末端的焦谷氨酸化、C末端的賴氨酸截除、氧化、脫酰胺等，這些不同的翻譯后修飾組合可使蛋白分子產生無數種電荷異構體。另外，單抗在特定的條件下會發生降解、斷裂，形成低分子量的片段。這些異構體對于蛋白藥物的穩定性及生物學功能發揮具有重要影響，需要用合適的方法進行分析。交互項和分組回歸關系在比較關鍵變量在兩個子群體的不同影響時，個人認為交乘項和...
c18色譜柱出廠時一般都封裝有甲醇或乙腈等有機溶劑。隨著時間的推移，色譜柱內的有機溶劑緩慢揮發，色譜柱內可能出現氣泡。因此，新購買的色譜柱在使用前一般都要進行活化操作。c18色譜柱的基質：硅膠基質：通用的基質，強度大，化學修飾容易，但使用的pH值范圍有限（一般為2—8，特殊修飾的可以達到1—12）。聚合物基質：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學穩定，應用pH范圍寬，具有更強的疏水性，對蛋白質等樣品分離效果較好；但強度較小，有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損，批次重復...
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