反相填料是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合極性較弱官能團(tuán)的鍵合相,常用類型包括C18、C8、C4、苯基柱等,其核心原理是通過疏水相互作用實現(xiàn)分子分離,廣泛應(yīng)用于藥物分析、生命科學(xué)及工業(yè)制備領(lǐng)域。
反相填料核心組成:
基質(zhì)材料
以高純度硅膠為基質(zhì),通過化學(xué)修飾(如鍵合烷基鏈、苯基等)形成疏水性表面。例如:
C18填料:鍵合18個碳原子的長鏈烷基,疏水性強,適用于非極性到中等極性化合物(如抗生素、類固醇)的分離。
C8填料:鍵合8個碳原子的短鏈烷基,疏水性較弱,保留能力低于C18,但分離速度更快,適合極性較大的化合物(如某些藥物中間體)。
苯基柱:表面修飾苯基基團(tuán),對芳香化合物具有選擇性,可通過π-π相互作用分離多環(huán)芳烴等。
分離機制
基于疏水相互作用:當(dāng)樣品分子進(jìn)入色譜柱時,非極性部分與填料表面的烷基鏈結(jié)合,極性分子則隨流動相(如水-甲醇混合液)優(yōu)先洗脫。通過調(diào)節(jié)流動相中有機溶劑比例,可控制分子保留時間,實現(xiàn)精準(zhǔn)分離。