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大孔吸附樹脂的操作要點涵蓋吸附、解吸、再生及安全防護(hù)等多個環(huán)節(jié),需根據(jù)目標(biāo)物質(zhì)性質(zhì)和樹脂類型精細(xì)調(diào)控。一、吸附操作要點樹脂預(yù)處理清洗:用乙醇浸泡樹脂24小時,去除雜質(zhì)和氣泡,再用蒸餾水洗至無醇味。活化:根據(jù)樹脂極性選擇預(yù)處理方式:非極性樹脂:用丙酮或甲醇浸泡后,水洗至中性。極性樹脂:用酸(如5%HCl)或堿(如5%NaOH)交替浸泡,水洗至中性。上樣液準(zhǔn)備濃度控制:上樣液濃度通常為0.1-1g/mL,濃度過高易導(dǎo)致樹脂堵塞,過低則效率低。pH調(diào)節(jié):根據(jù)目標(biāo)物質(zhì)極性調(diào)整pH值:...
凝膠過濾柱又稱分子篩層析柱或尺寸排阻層析柱,是一種基于分子大小差異進(jìn)行分離的層析技術(shù)核心工具。凝膠過濾柱的應(yīng)用場景:蛋白質(zhì)純化:去除雜蛋白、收集特定分子量范圍的組分。示例:Superdex75Increase10/300GL適用于重組標(biāo)簽蛋白的制備純化。脫鹽與緩沖液置換:分離大分子(如蛋白質(zhì))與小分子(如鹽離子)。常用凝膠:SephadexG-10、G-25。分子量測定:通過標(biāo)準(zhǔn)品繪制分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線,測定未知樣品的分子量。病毒與疫苗純化:分離病毒顆粒與細(xì)胞碎片,如Supero...
高效封閉液是實驗中常用的試劑,主要用于減少非特異性結(jié)合,提升實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和信噪比。其使用方法因產(chǎn)品類型和實驗體系的不同而有所差異,但通常遵循一套標(biāo)準(zhǔn)化的流程。一、使用前的準(zhǔn)備選擇合適的封閉液:根據(jù)實驗類型(如Westernblot、免疫熒光、免疫組化等)和膜的類型(如PVDF膜、NC膜等)選擇合適的高效封閉液。常見的封閉液類型包括BSA(牛血清白蛋白)封閉液、脫脂奶粉封閉液、即用型快速封閉液等。即用型快速封閉液因其操作便捷、封閉時間短而越來越受歡迎。準(zhǔn)備實驗材料:確保轉(zhuǎn)印...
凝膠色譜柱是一種重要的色譜分離工具,廣泛應(yīng)用于分子量分離、生物大分子純化以及高分子材料分析等領(lǐng)域。它基于凝膠滲透原理,通過柱內(nèi)填充的多孔凝膠介質(zhì),實現(xiàn)對不同分子大小的分離。一、工作原理凝膠色譜柱的分離原理基于“分子篩效應(yīng)”或稱“排阻效應(yīng)”。當(dāng)待分離的樣品溶液流經(jīng)填充有多孔凝膠的柱子時,不同分子大小的組分在通過柱床時表現(xiàn)出不同的通行路徑和速度。1、大分子:由于分子尺寸較大,無法進(jìn)入凝膠顆粒的孔隙,只能繞過凝膠顆粒表面,因此其流動路徑較短,容易較快通過柱子,較早洗脫。2、中等大小...
OJ-H手性柱核心解析:關(guān)鍵性能參數(shù)物理參數(shù)填料粒徑:5μm(H系列)與10μm(傳統(tǒng)型),5μm型號柱效更高、分辨率更優(yōu)。柱長與內(nèi)徑:提供150mm(快速分析)、250mm(標(biāo)準(zhǔn)分析)及半制備柱(10-50mm內(nèi)徑),支持從微克級到克級制備。pH范圍:2.0-7.5,耐受弱酸性至中性條件。溫度范圍:0-40℃,需避免高溫導(dǎo)致填料降解。壓力限制:5μm填料:建議操作壓力≤5MPa,最高耐壓30MPa。10μm填料:建議操作壓力≤3MPa,最高耐壓10MPa。流動相兼容性正相模...
凝膠色譜柱廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、酶、核酸、多糖等復(fù)雜生物大分子的分離純化及結(jié)構(gòu)表征,是生物化學(xué)、生物物理、生物醫(yī)學(xué)等學(xué)科中重要的工具。具體應(yīng)用包括:生物大分子的分離與純化:蛋白質(zhì)和多肽:可有效分離不同分子量、等電點和疏水性的蛋白質(zhì)與多肽。如在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,用于分離復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物,以鑒定和分析特定蛋白質(zhì);在生物制藥生產(chǎn)中,對重組蛋白、單克隆抗體等進(jìn)行純化精制,去除雜質(zhì)蛋白、多肽等。核酸:適用于分離DNA、RNA及其片段,對于研究核酸的結(jié)構(gòu)、功能、代謝以及基因工程等領(lǐng)域具有重...
選擇合適的反相c18色譜柱是液相色譜分析中至關(guān)重要的一步,它廣泛應(yīng)用于各種化合物的分離,尤其適用于非極性或低極性化合物的分析。其選擇不僅關(guān)系到分離效果,還直接影響到分析的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性和實驗效率。以下是選擇合適反相c18色譜柱時需要考慮的幾個關(guān)鍵因素。1、柱長與內(nèi)徑柱長和內(nèi)徑是影響色譜分離的兩個重要參數(shù)。柱長決定了分離的效率,通常柱長越長,分離效果越好,但樣品分析時間會相應(yīng)增加。柱內(nèi)徑則影響樣品的加載量和流速,內(nèi)徑越大,樣品的加載量越多,但對于高分辨率分離來說,較小內(nèi)徑的柱子...
異構(gòu)體是指分子式相同,但分子結(jié)構(gòu)不同的化合物。它們具有相同的原子組成和數(shù)量,但由于原子在空間中的排列方式或化學(xué)鍵的連接順序不同,導(dǎo)致其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)存在差異。異構(gòu)體主要分為構(gòu)造異構(gòu)體和立體異構(gòu)體兩大類。異構(gòu)體分析的意義:化學(xué)研究:異構(gòu)體的研究有助于深入理解分子的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)之間的關(guān)系,為有機(jī)化學(xué)的理論發(fā)展提供重要依據(jù)。通過研究異構(gòu)體的合成、反應(yīng)機(jī)理等,可以揭示化學(xué)反應(yīng)的本質(zhì)和規(guī)律。藥物研發(fā):在藥物領(lǐng)域,許多藥物分子存在對映異構(gòu)體,不同對映異構(gòu)體的藥效和毒性可能差異很大。因此...
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